本文需要一些显微镜的基础知识,详情见《显微基础丨认识显微镜及选购建议》。
此文章借鉴了Zeiss和Olympus的相关资料,资料放在了文章最末尾一章。
首先,我介绍一种显微镜保养的终极方法:找售后。
尤其是各个研究机构的高级牌子的复杂显微镜,请直接找售后,他们才是真正专业的。本文主要针对比较低端的教学/入门级别的显微镜。
一、显微镜的放置
显微镜的目镜应该与桌面边缘平齐,如下图。

左图:这样对使用者的颈椎不好;中图:正确放置;右图:有人经过桌旁时容易蹭到显微镜。
二、使用显微镜的身体姿势
图来自奥林巴斯网站的《Make Ergonomics Your Routine: The Right Sitting Posture》。
2.1 不要翘二郎腿
二郎腿容易使桌面振动。

2.2 背部要放松
请勿前倾或后仰

2.3 座椅高度适中
使手臂可以自然放在桌面上。

2.4 脖子放松自然直立
勿驼背。

三、3分钟检查显微镜为何无法成像
请先熟悉显微镜各部分的术语。详见显微镜新手入门教程。
①先在载物台上放置一个标本,并使用显微镜观察之:
- 如果视野中始终全黑或者半黑,请继续向下。
②检查部件:
- 沿着照明光路检查是否存在机械障碍物(滤光镜架/斜射暗场片/偏光片/三目抽插杆);
- 确认光源是否在工作(光源是否打开/标本处是否有亮光);
- 确保光学部件(尤其是聚光镜上表面)洁净。
③检查光路:
- 确保光路没有倾斜。检查各个光学部件的连接处是否存在歪斜。
- 确保光路的方向正确。(三目抽插杆位置是否正确/摄像头位置是否正确)
④检查摄像头:
- 确保目镜能看到。(如果目视看不到标本请从头开始检查)
- 确保摄像头的参数设置在合适的范围内。(曝光时间/ISO/亮度设置)
如果以上四个步骤后您还是没有看到样品,请联系设备的负责人或者相关售后。
四、3分钟找到光路中灰尘/污染的位置
一般,显微镜光路污染有两种常见的情况,如下图:

两幅图左半边都是正常视野,右半边都是被污染的视野;图1:点状污染,一般是由于落灰导致的。如视场光阑的灰尘(右上),摄像头感光芯片的污染(右下);图2:整面污染,一般是由于整个光学镜面被均匀污染。如镜油在下表面干掉的100X物镜(右),或者光路中有部件发霉。
原理:
- 如果落灰或污染的光学部件发生移动,那么成像污点就会跟着移动。所以我们使用排除法,从眼睛到光源逐一排除。
- 如果发现了污点位置,请先用放大镜仔细观察污点,若是灰尘就轻轻拿气吹吹走,若是溶液污染请拿相应的有机溶剂擦拭(见后文5.3)。
具体步骤如下:
- 动一下眼镜,看看污点是否随之运动。
- 转动目镜,观察污点是否随之旋转。
- 转动物镜转换器,观察不同物镜时污点是否一直存在。
- 移动标本,观察污点是否随之移动。
- 转动聚光镜,观察污点是否随之转动。
- 如果光路中有其他部件,如偏光片等,也都旋转一下来排除污染。
如果发现了污点位置,请先用放大镜仔细观察污点,若是灰尘就轻轻拿气吹吹走,若是溶液污染请拿相应的有机溶剂擦拭(见后文5.3)。
五、日常清洁与维护
显微镜在日常使用中难免落灰或者污染光学部件。所以学会正确的清洁与维护方法非常重要。
保持光学系统的洁净对于图像质量至关重要。如果对光学玻璃(如透镜、棱镜、滤光片等)上的污染放任不管,时间一长污垢就会变得难以清除,甚至还会导致发霉。
定期清洁来保持光学表面清洁,您可以避免许多维护问题,并延长显微镜的使用寿命。
注意事项: 以下清洁透镜表面的程序仅适用于物镜、目镜、聚光镜和滤光片的外表面区域。如果您需要进行内部或者大规模清洁保养,请联系您显微镜的售后。
另外,①下面文章中提到的擦拭手法,都是旋转擦拭法(见下图)。②如果镜头纸使用的是擦镜纸,就一律用光滑的一面进行清洁。

5.1 清洁显微镜镜架
镜架的材质一般由金属和塑料组成。
清洁的关键之处在于避免使用任何可能损坏塑料部件的清洁液。
分两步:
- 首先用少量中性清洁剂浸润的布擦拭污垢;
- 再用布蘸上温水彻底清除污垢。
5.2 清洁聚光镜等大玻璃的部件
①清洁滤光片的步骤如下:
- 将浸泡在清洁液的镜头纸折叠两三次。
- 手握住部件的边缘位置,请勿碰到玻璃表面。
- 一边缓慢旋转部件,一边从中心向外围擦拭。
②清洁聚光镜上下表面等大玻璃时,步骤如下:
- 用中指和食指夹住一张镜头纸。
- 将它折叠起来,然后包在您的食指上。
- 用拇指摁住镜头纸边缘,同时旋转擦拭透镜表面。
- 清洁后,用放大镜检查透镜表面。如果从透镜表面反射的颜色看起来不均匀,则表明透镜上仍有灰尘斑点和污垢。
提示:目镜从显微镜上取下来也可以替代放大镜使用。
5.3 清洁物镜目镜等小玻璃的部件
这些小玻璃才是显微镜最金贵的地方,所以请小心小心再小心。
自己操作实在不放心就请联系售后,切勿粗枝大叶的敷衍了事。
具体步骤如下:
- 为了防止玻璃涂层和镀膜被划伤,在各种处理之前,先用洗耳球或者气吹将灰尘颗粒吹掉。
- 用镜头纸包住一根棉签(见下图)。
- 在镜头纸的尖端蘸取少量清洁液(如无水乙醇或乙醚乙醇混合液),然后轻轻使用旋转擦拭法擦拭透镜。擦拭一次完成后立即丢弃镜头纸,如需继续擦拭请换新的镜头纸。
- 清洁完毕后,如需放进密封物镜盒,请在空气中放置4~5min后再放入密封盒,保证清洁液蒸发完全。

六、存放与运输
①显微镜在不使用时的日常存放:
- 检查光源是否已经关闭。
- 单/双/三目头放置目镜或摄像头的位置必须始终密封。必须使用目镜/摄像头/防尘塞来防止观察头的内部棱镜落灰。
- 请将显微镜罩上防尘罩。
- 确保放置地点是干燥阴凉处,切勿晒太阳或者接触大量水蒸气。
- 切勿将显微镜放置在可能受到腐蚀性酸性或碱性气体影响的地方。
②显微镜的长期存放:
- 显微镜不应该长时间放在泡沫塑料盒中,快递到了就赶紧拆。
- 显微镜应罩上防尘罩保存,但切勿完全密封,如果出现特殊情况,完全密封只会使得显微镜更快发霉。
- 如果可能的话,放在阴凉干燥的柜子里。
- 确保存放地点无腐蚀性气体。
③多余物镜在不使用时的日常存放:
- 确保物镜已经将镜油或其他污渍清洁干净。
- 在清洁后需在空气里防止几分钟,以保证清洁液全部挥发。
- 放入干净的物镜盒中。
- 将物镜盒放到干燥阴凉处。
④显微镜的运输:
- 非必要情况请勿长距离运输,长距离运输必须做好减震。
- 短距离移动请确保两人在场,一人用双手,一手托镜臂,一手托底,小心缓慢的移动,另一人再旁观察,及时提醒障碍物的方位。就像您的爱车正在倒车入库一样。
七、针对明暗场/相差/DIC/荧光等特殊观察方法的调整
笔者不是专业售后,所以就不班门弄斧了。官方文档网上都能查到,大家自行查阅。
**如果您对这一部分有问题的话,我还是推荐直接找售后。**毕竟不同的显微镜,部件和操作方法也有所区别,还是直接找售后比较稳妥。